慢性肾衰模型操作步骤

慢性肾衰模型的建立通常涉及多种方法，其中两种常见的方法包括物理学方法和生物学方法。以下是两种方法的操作步骤：

物理学方法：肾大部分切除法

1. 准备动物：选择体重约250g的成年大鼠，按30mg/kg体重的剂量注射戊babi妥钠进行麻醉。

2. 手术操作：

• 麻醉后，将大鼠仰卧固定，腹部备皮、消毒。

• 沿左腹旁切口切开皮肤，暴露左侧肾脏，切开上、下极的包膜，上下极分别切除肾脏的1/3。

• 使用明胶海绵压迫创面止血，生理盐水冲洗后，常规手术缝合肌层和皮肤，关闭腹腔。

3. 后续处理：

• 一周后，以同样方法麻醉大鼠，沿右腹旁切口切开皮肤，暴露右侧肾脏，结扎肾蒂后切除右肾。

• 造模前后将模型大鼠置于代谢笼收集24小时尿液，测定24小时蛋白定量。

• 按实验预定时间取静脉血样测定血肌酐（SCr）、血尿素氮（BUN）。

• 麻醉后放血法处死动物，取动物残肾组织标本，进行后续的组织学观察。

生物学方法：带阳电荷牛血清白蛋白（C-BSA）法

1. 制备C-BSA：

• 将无水乙二胺（EDA）与双蒸水、HCl混合，调整pH值，并加入牛血清白蛋白（BSA）和无碘EDC（碳化二亚胺）搅拌，制备成C-BSA。

2. 免疫处理：

• 选择体重约2.5kg的新西兰兔，经耳缘静脉注射预先制备的C-BSA和大肠杆菌内毒素进行预免疫。

• 一周后，每日从耳缘静脉注射C-BSA，持续5周，进行致病免疫。

• 再隔日注射C-BSA，持续5周，整个造模时间为10周。

3. 后续处理：

• 同时取肾组织作电镜标本，在透射电镜下观察肾组织的变化。

以上步骤为慢性肾衰模型建立的常见方法，但请注意，具体实验步骤可能因实验条件和要求而略有不同。在实验过程中，请遵循实验室的规范和安全操作程序。