常见的2种脑缺血模型的操作步骤

脑缺血模型的制备，特别是针对大鼠的模型，通常涉及多个步骤。以下是两种常见的脑缺血模型（MCAO模型和CVA模型）的制备步骤：

一、MCAO模型制备

1. 线栓的制备：

• 选用直径为0.26mm的钓鱼线，用锋利薄刀片将线身垂直截成5cm长的小段。

• 用细砂纸打磨头端棱角，在体视镜下选出头端光滑钝圆、大小一致者。

• 在距线栓头端20mm处做一标记，将线栓浸泡消毒后晾干。

• 术前置于无菌生理盐水中备用，线栓临用前浸蘸2.5×1000000U/L肝素钠。

2. 术前动物准备：

• 分笼饲养（室温20～23℃，湿度60%～70%），明暗光照12h:12h，适应性饲养1～2d。

• 术前12h禁食，自由饮水。

3. 动物麻醉：

• 以3.6%水合氯醛腹腔内注射麻醉（10ml/kg）。

• 注射器针头从腹部向头方向刺入腹腔，回抽针芯阻力较大、无回血、无胃肠道内容物时，缓慢推注。

• 约10min后大鼠逐渐瘫软，反应淡漠，用手牵拉鼠尾无明显反抗时置仰卧位，固定上颌中切牙和四肢。

4. 手术步骤：

• 颈部正中剃毛消毒备用。

• 剪开颈部皮肤，钝性分离颈部肌肉，暴露并游离单侧颈动脉，穿线备用。

• 结扎颈内动脉，结扎主动脉近心端，松开动脉夹。

• 游离ECA主干，电凝闭塞ECA的分支，结扎远心端并将其离断。

• 在ECA残端用眼科剪剪开一“V”型小口，剪口之前用微动脉夹夹闭CCA和CA。

• 将预处理过的长2cm的4-0线栓小心地从ECA插入。

• 去除ICA的微动脉夹后，插入尼龙线栓直至大脑中动脉的起始处，线栓插入的长度应根据动物体重，以遇到轻微的阻力为准。

• 若要恢复大脑中动脉的血流，只需把线栓拔出，使头端退到颈外动脉，颈总动脉的血流就可以再灌注到大脑中动脉。

5. 术后处理：

• 结扎消毒后逐层缝合皮下组织和皮肤，等动物麻醉苏醒后放回笼中即可。

二、CVA模型制备

1. 动物麻醉：与MCAO模型相同，使用10%水合氯醛（300uL/100g）麻醉保定，俯卧卧位。

2. 手术步骤：

• 颈部正中剃毛消毒备用。

• 剥离皮肤和肌肉，暴露第一颈椎横突翼，找到左右两侧横突孔。

• 将灼热的电烙铁尖头直接插入翼突孔，电凝双侧椎动脉造成永久性闭塞，避免损伤脊髓和脑干。

• 逐层缝合枕部皮肤，并消毒。

• 之后，仰卧位消毒备用，游离双侧颈总动脉，留线备用，动脉夹夹闭双侧颈总动脉15-30分钟，松开动脉夹，逐层缝合，手术完成。

以上步骤为脑缺血模型制备的基本流程，但具体实验步骤可能因实验条件和要求而略有不同，建议在实验前仔细阅读实验方案并遵循操作规范。