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细胞系STR鉴定

作者: 点击:178 发布时间:2024-06-03

自2015年4月起,《自然》(Nature)杂志宣布,其出版的所有期刊将从同年5月起,强制要求投稿作者对其研究中使用的细胞系进行验证,以提升科研数据的准确性和可靠性。这一举措强调了细胞验证的重要性,其中短串联重复序列(STR)基因分型被国际细胞系鉴定委员会(ICLAC)和美国典型培养物保藏中心(ATCC)等权威组织认定为细胞鉴定的黄金标准。当前,提交含有细胞实验的学术论文时,附带细胞STR分型图谱已成为一个不可或缺的组成部分。

STRs是一系列由3至7个碱基对组成的重复单位,在人基因组中分布广泛,因其高变异性而被视为细胞的遗传“指纹”。STR分析通过PCR技术实现,能够识别这些重复序列拷贝数的差异,进而在毛细管电泳和荧光标记的帮助下,区分不同的等位基因变异。

针对细胞系的STR鉴定服务遵循严格的流程,具体包括:

  1. 样本需求:要求客户将细胞样本在低温条件下运送,确保细胞数量不低于一百万(10^6)。

  2. 实验步骤

    • DNA提取:首先从提供的细胞中纯化出高质量的DNA。

    • STR位点扩增:运用PCR技术特异性地扩增多个预先选定的STR基因座。

    • 毛细管电泳分离:利用毛细管电泳技术将不同长度的扩增产物按大小分离。

    • STR基因分型解读:基于电泳结果,确定每个STR位点的具体基因型。

    • 数据库比对:最后,将所得的STR分型结果与已知数据库中的信息进行比对,以确认细胞系的身份及纯度,避免混淆或交叉污染的情况。



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结果交付:

细胞系STR鉴定报告一份,包括细胞STR分型检测结果,权威数据库匹配情况,是否存在交叉污染(是否有多等位基因)。


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