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血清保存与处理的关键指南
在生物学实验中,正确保存和处理血清对于维持其质量和实验的可靠性至关重要。以下是几个核心要点:
长期储存:血清应储存在-20°C至-70°C的低温冰箱中,以确保长期稳定。避免在4°C冰箱中存放超过1个月,因为血清冷冻时体积膨胀约10%。储存前预留足够空间,以防溢出或容器破裂导致污染。
热灭活注意事项:热灭活指在56°C下加热血清30分钟,期间需持续摇动以均匀加热,目的是灭活血清中的补体成分。但请注意,热处理可能导致沉淀增多并影响血清品质,因此非必要不推荐。补体在免疫反应中扮演多重角色,如细胞毒性、促进炎症反应等。
正确解冻:血清应逐步解冻,先从低温冰箱移至4°C过夜,再转至室温完全溶解,过程中轻摇避免气泡,确保温度均匀,减少沉淀。避免剧烈温差导致蛋白质凝聚。
无菌考量:市售血清通常已无菌处理,若有可见悬浮物,可与培养液一同过滤,不可直接过滤血清。
处理沉淀:血清中可能出现的絮状物多为脂蛋白变性或纤维蛋白,通常不影响血清质量,可通过离心去除,或视情况保留。热处理后的小黑点状沉淀同样常见,通常不影响细胞培养,但若疑虑血清品质,应及时更换批次。
避免高温暴露:长时间在37°C环境下存放血清会导致其浑浊,并可能破坏有效成分,影响实验结果。
严格遵循这些保存和处理指南,可以有效维护血清的高品质,确保实验数据的准确性和可重复性。
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