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shRNA载体构建
产品详情
技术原理
首先设计根据需求设计shRNA引物一套,完成引物退火。将载体进行双酶切反应,双酶切后割胶回收。将shRNA和双酶切回收后的载体,使用试剂盒进行重组成环状片段,转入制备好的细菌感受态细胞,对长出的单克隆菌落送测序公司进行测序鉴定,比对正确的克隆即为构建成功的shRNA表达载体。
shRNA的靶点选择决定着对靶向基因的表达敲低效果,通常涉及3-4个shRNA靶点同时进行实验,根据后续检测结果确定最佳靶点后,安排后续实验。
实验方法
技术总结
体内抑制效果强:
shRNA表达载体生物体内的抑制效果强于普通合成的siRNA,且能与组织特异性定位启动子协同作用。
诱导表达功能:
科研人员可以通过shRNA表达载体服务建立可诱导表达系统,控制siRNA的表达。
转染细胞易富集:
载体上可附加抗生素抗性,筛除未转染的细胞,轻松富集有沉默潜力的细胞。
干扰效果长期有效:
shRNA表达载体能帮助研究人员获得稳定细胞系,并保证RNA干扰的长期性。
实验操作简便:
shRNA表达载体将以质粒的形式寄给客户,这种形式比一般合成的siRNA更加稳定,操作也更加简单。同时,由于载体可重复操作,客户使用更加方便。
优惠的价格:
shRNA表达载体的可重复操作性降低了其高通量应用的价格,满足了siRNA客户的大量需求。
可用于基因治疗:
构建在病毒载体上的shRNA能被应用于感染基因治疗核心细胞系。
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